Javascript បច្ចុប្បន្នត្រូវបានបិទនៅក្នុងកម្មវិធីរុករករបស់អ្នក។នៅពេលដែល javascript ត្រូវបានបិទ មុខងារមួយចំនួននៃគេហទំព័រនេះនឹងមិនដំណើរការទេ។
ចុះឈ្មោះព័ត៌មានលម្អិតជាក់លាក់របស់អ្នក និងថ្នាំជាក់លាក់ដែលអ្នកចាប់អារម្មណ៍ ហើយយើងនឹងផ្គូផ្គងព័ត៌មានដែលអ្នកផ្តល់ជាមួយអត្ថបទនៅក្នុងមូលដ្ឋានទិន្នន័យដ៏ទូលំទូលាយរបស់យើង ហើយផ្ញើច្បាប់ចម្លង PDF មកអ្នកតាមរយៈអ៊ីមែលក្នុងលក្ខណៈទាន់ពេលវេលា។
គ្រប់គ្រងចលនានៃ nanoparticles អុកស៊ីដដែកម៉ាញេទិកសម្រាប់ការចែកចាយ cytostatics គោលដៅ
អ្នកនិពន្ធ Toropova Y, Korolev D, Istomina M, Shulmeyster G, Petukhov A, Mishanin V, Gorshkov A, Podyacheva E, Gareev K, Bagrov A, Demidov O
Yana Toropova,1 Dmitry Korolev,1 Maria Istomina,1,2 Galina Shulmeyster,1 Alexey Petukhov,1,3 Vladimir Mishanin,1 Andrey Gorshkov,4 Ekaterina Podyacheva,1 Kamil Gareev,2 Alexei Bagrov,5 Oleg Demidov6,71Almazov National Medical មជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវនៃក្រសួងសុខាភិបាលនៃសហព័ន្ធរុស្ស៊ី, ផ្លូវ Petersburg, 197341, សហព័ន្ធរុស្ស៊ី;2 St. Petersburg Electrotechnical University “LETI”, St. Petersburg, 197376, Russian Federation;3 មជ្ឈមណ្ឌលវេជ្ជសាស្ត្រផ្ទាល់ខ្លួន មជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្ររដ្ឋ Almazov ក្រសួងសុខាភិបាលនៃសហព័ន្ធរុស្ស៊ី ផ្លូវ Petersburg ឆ្នាំ 197341 សហព័ន្ធរុស្ស៊ី;4FSBI "វិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវជំងឺគ្រុនផ្តាសាយដាក់ឈ្មោះតាម AA Smorodintsev" ក្រសួងសុខាភិបាលនៃសហព័ន្ធរុស្ស៊ី, St. Petersburg, សហព័ន្ធរុស្ស៊ី;5 វិទ្យាស្ថាន Sechenov នៃសរីរវិទ្យាវិវត្តន៍ និងជីវគីមីវិទ្យា បណ្ឌិតសភាវិទ្យាសាស្ត្ររុស្ស៊ី ផ្លូវ Petersburg សហព័ន្ធរុស្ស៊ី;6 RAS Institute of Cytology, St. Petersburg, 194064, សហព័ន្ធរុស្ស៊ី;7INSERM U1231, មហាវិទ្យាល័យវេជ្ជសាស្ត្រ និងឱសថស្ថាន, Bourgogne-Franche Comté University of Dijon, France Communication: Yana ToropovaAlmazov National Medical Research Centre, Ministry of Health of the Russian Federation, Saint-Petersburg, 197341, Russian Federation Tel +7 981 95269706 4 អ៊ីម៉ែល [email protected] ផ្ទៃខាងក្រោយ៖ វិធីសាស្រ្តដ៏ជោគជ័យមួយចំពោះបញ្ហានៃការពុល cytostatic គឺការប្រើប្រាស់សារធាតុ nanoparticles ម៉ាញេទិក (MNP) សម្រាប់ការចែកចាយថ្នាំតាមគោលដៅ។គោលបំណង៖ ដើម្បីប្រើប្រាស់ការគណនាដើម្បីកំណត់លក្ខណៈល្អបំផុតនៃដែនម៉ាញេទិកដែលគ្រប់គ្រង MNPs នៅក្នុង vivo និងដើម្បីវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពនៃការបញ្ជូន magnetron នៃ MNPs ទៅកាន់ដុំសាច់កណ្តុរនៅក្នុង vitro និង in vivo ។(MNPs-ICG) ត្រូវបានប្រើ។ការសិក្សាអំពីអាំងតង់ស៊ីតេ luminescence នៅក្នុង vivo ត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងដុំសាច់កណ្តុរ ដោយមាន និងគ្មានដែនម៉ាញេទិកនៅកន្លែងចាប់អារម្មណ៍។ការសិក្សាទាំងនេះត្រូវបានអនុវត្តនៅលើរន្ទាធារាសាស្ត្រដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយវិទ្យាស្ថានវេជ្ជសាស្ត្រពិសោធន៍នៃមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្ររដ្ឋ Almazov នៃក្រសួងសុខាភិបាលរុស្ស៊ី។លទ្ធផល៖ ការប្រើប្រាស់មេដែក neodymium បានលើកកម្ពស់ការប្រមូលផ្តុំជ្រើសរើសនៃ MNP ។មួយនាទីបន្ទាប់ពីការគ្រប់គ្រង MNPs-ICG ទៅសត្វកណ្តុរដែលមានដុំសាច់ MNPs-ICG ភាគច្រើនប្រមូលផ្តុំនៅក្នុងថ្លើម។អវត្ដមាន និងវត្តមាននៃដែនម៉ាញេទិក នេះបង្ហាញពីផ្លូវមេតាបូលីសរបស់វា។ទោះបីជាការកើនឡើងនៃ fluorescence នៅក្នុងដុំសាច់ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងវត្តមាននៃដែនម៉ាញ៉េទិចក៏ដោយអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence នៅក្នុងថ្លើមរបស់សត្វមិនផ្លាស់ប្តូរតាមពេលវេលាទេ។សេចក្តីសន្និដ្ឋាន៖ ប្រភេទ MNP នេះ រួមផ្សំជាមួយនឹងកម្លាំងនៃដែនម៉ាញេទិកដែលបានគណនា អាចជាមូលដ្ឋានសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍនៃការគ្រប់គ្រងដោយម៉ាញេទិកនៃសារធាតុ cytostatic ទៅកាន់ជាលិកាដុំសាច់។ពាក្យគន្លឹះ៖ ការវិភាគហ្វ្លុយអូរីស, indocyanine, ភាគល្អិតណាណូអុកស៊ីដជាតិដែក, ការផ្តល់ម៉ាញេតុននៃ cytostatics, ការកំណត់គោលដៅដុំសាច់
ជំងឺដុំសាច់គឺជាមូលហេតុចម្បងមួយនៃការស្លាប់នៅទូទាំងពិភពលោក។ទន្ទឹមនឹងនេះ សក្ដានុពលនៃការកើនឡើងនៃជំងឺ និងការស្លាប់នៃជំងឺដុំសាច់នៅតែមាន។1 ការព្យាបាលដោយប្រើគីមីដែលប្រើសព្វថ្ងៃនេះនៅតែជាវិធីព្យាបាលសំខាន់មួយសម្រាប់ដុំសាច់ផ្សេងៗ។ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះការអភិវឌ្ឍន៍នៃវិធីសាស្រ្តដើម្បីកាត់បន្ថយការពុលជាប្រព័ន្ធនៃ cytostatics នៅតែពាក់ព័ន្ធ។វិធីសាស្រ្តដ៏ជោគជ័យមួយក្នុងការដោះស្រាយបញ្ហាជាតិពុលរបស់វាគឺការប្រើឧបករណ៍ដឹកជញ្ជូនខ្នាតណាណូដើម្បីកំណត់គោលដៅនៃវិធីសាស្ត្រចែកចាយថ្នាំ ដែលអាចផ្តល់នូវការប្រមូលផ្តុំថ្នាំក្នុងតំបន់នៅក្នុងជាលិកាដុំសាច់ដោយមិនបង្កើនការប្រមូលផ្តុំរបស់វានៅក្នុងសរីរាង្គ និងជាលិកាដែលមានសុខភាពល្អ។ការផ្តោតអារម្មណ៍។2 វិធីសាស្រ្តនេះធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវប្រសិទ្ធភាព និងការកំណត់គោលដៅនៃថ្នាំគីមីនៅលើជាលិកាដុំសាច់ ខណៈពេលដែលកាត់បន្ថយការពុលប្រព័ន្ធរបស់វា។
ក្នុងចំណោមភាគល្អិត nanoparticles ជាច្រើនដែលត្រូវបានពិចារណាសម្រាប់ការចែកចាយជាគោលដៅនៃភ្នាក់ងារ cytostatic, ភាគល្អិតម៉ាញេទិក nanoparticles (MNPs) មានការចាប់អារម្មណ៍ជាពិសេសដោយសារតែលក្ខណៈសម្បត្តិគីមី ជីវសាស្ត្រ និងម៉ាញេទិកតែមួយគត់របស់ពួកគេ ដែលធានាបាននូវភាពបត់បែនរបស់វា។ដូច្នេះ សារធាតុ nanoparticles ម៉ាញេទិក អាចត្រូវបានប្រើជាប្រព័ន្ធកំដៅ ដើម្បីព្យាបាលដុំសាច់ដែលមានកម្តៅខ្លាំង (magnetic hyperthermia)។ពួកវាក៏អាចត្រូវបានប្រើជាភ្នាក់ងាររោគវិនិច្ឆ័យ (ការវិនិច្ឆ័យម៉ាញ៉េទិច) ។3-5 ដោយប្រើលក្ខណៈទាំងនេះ រួមផ្សំជាមួយនឹងលទ្ធភាពនៃការប្រមូលផ្តុំ MNP នៅក្នុងតំបន់ជាក់លាក់មួយ តាមរយៈការប្រើប្រាស់ដែនម៉ាញេទិកខាងក្រៅ ការផ្តល់ការត្រៀមលក្ខណៈឱសថគោលដៅបើកការបង្កើតប្រព័ន្ធម៉ាញេទិកពហុមុខងារដើម្បីកំណត់គោលដៅ cytostatics ទៅកាន់កន្លែងដុំសាច់។ ការរំពឹងទុក។ប្រព័ន្ធបែបនេះនឹងរួមបញ្ចូល MNP និងវាលម៉ាញេទិកដើម្បីគ្រប់គ្រងចលនារបស់ពួកគេនៅក្នុងរាងកាយ។ក្នុងករណីនេះ ទាំងដែនម៉ាញេទិចខាងក្រៅ និងការផ្សាំម៉ាញេទិកដែលដាក់នៅក្នុងតំបន់រាងកាយដែលមានដុំសាច់នោះ អាចត្រូវបានប្រើជាប្រភពនៃដែនម៉ាញេទិក។6 វិធីសាស្រ្តដំបូងមានចំណុចខ្វះខាតធ្ងន់ធ្ងរ រួមទាំងតម្រូវការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ឯកទេសសម្រាប់កំណត់គោលដៅម៉ាញេទិកនៃឱសថ និងតម្រូវការបណ្តុះបណ្តាលបុគ្គលិកដើម្បីធ្វើការវះកាត់។លើសពីនេះ វិធីសាស្ត្រនេះត្រូវបានកំណត់ដោយការចំណាយខ្ពស់ ហើយសមរម្យសម្រាប់តែដុំសាច់ "លើ" ដែលនៅជិតផ្ទៃនៃរាងកាយប៉ុណ្ណោះ។វិធីសាស្រ្តជំនួសនៃការប្រើប្រាស់ការផ្សាំម៉ាញេទិកពង្រីកវិសាលភាពនៃការអនុវត្តបច្ចេកវិទ្យានេះ ដោយសម្រួលដល់ការប្រើប្រាស់របស់វាលើដុំសាច់ដែលមានទីតាំងនៅផ្នែកផ្សេងៗនៃរាងកាយ។ទាំងមេដែកបុគ្គល និងមេដែកដែលរួមបញ្ចូលទៅក្នុង stent intraluminal អាចត្រូវបានប្រើជាការផ្សាំសម្រាប់ការខូចខាតដុំសាច់នៅក្នុងសរីរាង្គប្រហោង ដើម្បីធានាបាននូវភាពអត់ធ្មត់របស់វា។ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ យោងទៅតាមការស្រាវជ្រាវដែលមិនបានផ្សព្វផ្សាយរបស់យើង ទាំងនេះមិនមែនជាម៉ាញេទិកគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីធានាការរក្សា MNP ពីចរន្តឈាមនោះទេ។
ប្រសិទ្ធភាពនៃការផ្តល់ថ្នាំ Magnetron អាស្រ័យទៅលើកត្តាជាច្រើន៖ លក្ខណៈនៃក្រុមហ៊ុនបញ្ជូនម៉ាញេទិកខ្លួនវា និងលក្ខណៈនៃប្រភពដែនម៉ាញេទិក (រួមទាំងប៉ារ៉ាម៉ែត្រធរណីមាត្រនៃមេដែកអចិន្ត្រៃយ៍ និងកម្លាំងនៃដែនម៉ាញេទិកដែលពួកគេបង្កើត)។ការអភិវឌ្ឍន៍បច្ចេកវិជ្ជាចែកចាយថ្នាំទប់ស្កាត់កោសិកាដែលដឹកនាំដោយមេដែកដោយជោគជ័យ គួរតែពាក់ព័ន្ធនឹងការវិវឌ្ឍន៍នៃក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូនឱសថណាណូម៉ាញេទិកដែលសមស្រប ការវាយតម្លៃសុវត្ថិភាពរបស់ពួកគេ និងការបង្កើតពិធីការមើលឃើញដែលអនុញ្ញាតឱ្យតាមដានចលនារបស់ពួកគេនៅក្នុងរាងកាយ។
នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងបានគណនាតាមគណិតវិទ្យានូវលក្ខណៈនៃដែនម៉ាញេទិចដ៏ល្អប្រសើរ ដើម្បីគ្រប់គ្រងឧបករណ៍ផ្ទុកថ្នាំខ្នាតម៉ាញេទិកក្នុងរាងកាយ។លទ្ធភាពនៃការរក្សា MNP តាមរយៈជញ្ជាំងសរសៃឈាមក្រោមឥទ្ធិពលនៃវាលម៉ាញេទិកដែលបានអនុវត្តជាមួយនឹងលក្ខណៈគណនាទាំងនេះក៏ត្រូវបានសិក្សាផងដែរនៅក្នុងសរសៃឈាមកណ្តុរដាច់ដោយឡែក។លើសពីនេះទៀត យើងបានសំយោគការរួមផ្សំនៃ MNPs និងភ្នាក់ងារ fluorescent និងបានបង្កើតពិធីការសម្រាប់ការមើលឃើញរបស់ពួកគេនៅក្នុង vivo ។នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌ vivo នៅក្នុងសត្វកណ្តុរគំរូដុំសាច់ ប្រសិទ្ធភាពនៃការប្រមូលផ្តុំ MNPs នៅក្នុងជាលិកាដុំសាច់នៅពេលដែលត្រូវបានគ្រប់គ្រងជាប្រព័ន្ធក្រោមឥទ្ធិពលនៃដែនម៉ាញេទិកត្រូវបានសិក្សា។
នៅក្នុងការសិក្សានៅក្នុង vitro យើងបានប្រើឯកសារយោង MNP ហើយនៅក្នុងការសិក្សានៅក្នុង vivo យើងបានប្រើ MNP ដែលស្រោបដោយអាស៊ីតឡាក់ទិក polyester (អាស៊ីត polylactic, PLA) ដែលមានភ្នាក់ងារ fluorescent (indolecyanine; ICG) ។MNP-ICG ត្រូវបានដាក់បញ្ចូលក្នុង ករណីប្រើប្រាស់ (MNP-PLA-EDA-ICG)។
ការសំយោគ និងលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវន្ត និងគីមីរបស់ MNP ត្រូវបានពិពណ៌នាលម្អិតនៅកន្លែងផ្សេង។៧,៨
ដើម្បីសំយោគ MNPs-ICG, PLA-ICG conjugates ត្រូវបានផលិតដំបូង។ល្បាយម្សៅនៃ PLA-D និង PLA-L ដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុល 60 kDa ត្រូវបានប្រើប្រាស់។
ដោយសារ PLA និង ICG គឺជាអាស៊ីតទាំងពីរ ដើម្បីសំយោគ PLA-ICG conjugates ដំបូងចាំបាច់ត្រូវសំយោគ spacer ដែលត្រូវបានបញ្ចប់ដោយអាមីណូនៅលើ PLA ដែលជួយ ICG chemisorb ទៅ spacer ។spacer ត្រូវបានសំយោគដោយប្រើ ethylene diamine (EDA) វិធីសាស្ត្រ carbodiimide និង carbodiimide ដែលរលាយក្នុងទឹក 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDAC) ។PLA-EDA spacer ត្រូវបានសំយោគដូចខាងក្រោម។បន្ថែមថ្គាម 20 ដងនៃ EDA និង 20 ដងនៃ molar លើស EDAC ទៅ 2 mL នៃ 0.1 g/mL ដំណោះស្រាយ PLA chloroform ។ការសំយោគត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងបំពង់សាកល្បងប៉ូលីភីលីនលីន 15 មីលីលីត្រនៅលើទឹកក្រឡុកក្នុងល្បឿន 300 នាទី-1 រយៈពេល 2 ម៉ោង។គ្រោងការណ៍សំយោគត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 1. ធ្វើសំយោគឡើងវិញជាមួយនឹង 200 ដងលើសនៃ reagents ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពគ្រោងការណ៍សំយោគ។
នៅចុងបញ្ចប់នៃការសំយោគ ដំណោះស្រាយត្រូវបាន centrifuged ក្នុងល្បឿន 3000 min-1 សម្រាប់រយៈពេល 5 នាទី ដើម្បីដកដេរីវេ polyethylene លើសចំណុះ។បន្ទាប់មក 2 mL នៃដំណោះស្រាយ ICG 0.5 mg/mL ក្នុង dimethyl sulfoxide (DMSO) ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងដំណោះស្រាយ 2 mL ។ឧបករណ៍ដុតត្រូវបានជួសជុលក្នុងល្បឿនកូរ 300 នាទី-1 រយៈពេល 2 ម៉ោង។ដ្យាក្រាម schematic នៃ conjugate ដែលទទួលបានត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 2 ។
ក្នុង 200 mg MNP យើងបានបន្ថែម 4 mL PLA-EDA-ICG conjugate ។ប្រើ LS-220 shaker (LOIP, Russia) ដើម្បីកូរការផ្អាករយៈពេល 30 នាទីនៅប្រេកង់ 300 min-1 ។បន្ទាប់មកវាត្រូវបានទឹកនាំទៅជាមួយ isopropanol បីដងហើយត្រូវបានទទួលរងនូវការបំបែកមេដែក។ប្រើ UZD-2 Ultrasonic Disperser (FSUE NII TVCH, Russia) ដើម្បីបន្ថែម IPA ទៅនឹងការព្យួររយៈពេល 5-10 នាទីក្រោមសកម្មភាព ultrasonic ជាបន្តបន្ទាប់។បន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត IPA លើកទី 3 ទឹកភ្លៀងត្រូវបានទឹកនាំទៅដោយទឹកចម្រោះហើយត្រូវបានផ្អាកឡើងវិញក្នុងទឹកអំបិលខាងសរីរវិទ្យានៅកំហាប់ 2 mg/mL ។
ឧបករណ៍ ZetaSizer Ultra (Malvern Instruments, UK) ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាការចែកចាយទំហំនៃ MNP ដែលទទួលបាននៅក្នុងដំណោះស្រាយ aqueous ។មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងបញ្ជូន (TEM) ជាមួយកាតូដបំភាយវាល JEM-1400 STEM (JEOL ប្រទេសជប៉ុន) ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សារូបរាង និងទំហំរបស់ MNP ។
នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងប្រើប្រាស់មេដែកអចិន្ត្រៃយ៍ស៊ីឡាំង (N35 ថ្នាក់ទី ជាមួយនឹងថ្នាំកូតការពារនីកែល) និងទំហំស្តង់ដារដូចខាងក្រោម (ប្រវែងអ័ក្សវែង × អង្កត់ផ្ចិតស៊ីឡាំង): 0.5 × 2 មម 2 × 2 មម 3 × 2 មម និង 5 × 2 ។ ម
ការសិក្សានៅក្នុង vitro នៃការដឹកជញ្ជូន MNP នៅក្នុងប្រព័ន្ធគំរូត្រូវបានអនុវត្តនៅលើរន្ទាធារាសាស្ត្រដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយវិទ្យាស្ថានវេជ្ជសាស្ត្រពិសោធន៍នៃមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្ររដ្ឋ Almazov នៃក្រសួងសុខាភិបាលរុស្ស៊ី។បរិមាណនៃសារធាតុរាវចរាចរ (ទឹកចម្រោះឬដំណោះស្រាយ Krebs-Henseleit) គឺ 225 មីលីលីត្រ។មេដែករាងស៊ីឡាំងដែលមានមេដែកតាមអ័ក្ស ត្រូវបានប្រើជាមេដែកអចិន្ត្រៃយ៍។ដាក់មេដែកនៅលើអ្នកកាន់ចម្ងាយ 1.5 មីលីម៉ែត្រពីជញ្ជាំងខាងក្នុងនៃបំពង់កែវកណ្តាល ដោយចុងរបស់វាបែរមុខទៅទិសនៃបំពង់ (បញ្ឈរ)។អត្រាលំហូរសារធាតុរាវនៅក្នុងរង្វង់បិទគឺ 60 L/h (ត្រូវគ្នាទៅនឹងល្បឿនលីនេអ៊ែរ 0.225 m/s)។ដំណោះស្រាយ Krebs-Henseleit ត្រូវបានគេប្រើជាសារធាតុរាវចរាចរព្រោះវាជាអាណាឡូកនៃប្លាស្មា។មេគុណ viscosity ថាមវន្តនៃប្លាស្មាគឺ 1.1–1.3 mPa∙s ។9 បរិមាណ MNP adsorbed ក្នុងដែនម៉ាញេទិកត្រូវបានកំណត់ដោយ spectrophotometry ពីការផ្តោតអារម្មណ៍នៃជាតិដែកនៅក្នុងរាវដែលចរាចរបន្ទាប់ពីការពិសោធន៍។
លើសពីនេះ ការសិក្សាពិសោធន៍ត្រូវបានអនុវត្តនៅលើតារាងមេកានិចនៃសារធាតុរាវដែលប្រសើរឡើងដើម្បីកំណត់ភាពជ្រាបចូលនៃសរសៃឈាមដែលទាក់ទង។សមាសធាតុសំខាន់នៃការគាំទ្រអ៊ីដ្រូឌីណាមិកត្រូវបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 3. សមាសធាតុសំខាន់នៃ stent hydrodynamic គឺជារង្វិលជុំបិទជិតដែលក្លែងធ្វើផ្នែកឆ្លងកាត់នៃប្រព័ន្ធសរសៃឈាមគំរូ និងធុងផ្ទុក។ចលនានៃសារធាតុរាវគំរូតាមវណ្ឌវង្កនៃម៉ូឌុលសរសៃឈាមត្រូវបានផ្តល់ដោយស្នប់ peristaltic ។ក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ រក្សាការបំភាយឧស្ម័ន និងជួរសីតុណ្ហភាពដែលត្រូវការ ហើយតាមដានប៉ារ៉ាម៉ែត្រប្រព័ន្ធ (សីតុណ្ហភាព សម្ពាធ អត្រាលំហូររាវ និងតម្លៃ pH)។
រូបភាពទី 3 ដ្យាក្រាមប្លុកនៃការដំឡើងដែលប្រើដើម្បីសិក្សាពីភាពជ្រាបចូលនៃជញ្ជាំងសរសៃឈាម carotid ។1- ធុងផ្ទុក 2- ស្នប់ peristaltic 3- យន្តការសម្រាប់ណែនាំការព្យួរដែលមាន MNP ចូលទៅក្នុងរង្វិលជុំ 4- លំហូរម៉ែត្រ 5- ឧបករណ៏សម្ពាធក្នុងរង្វិលជុំ 6- ឧបករណ៍ផ្លាស់ប្តូរកំដៅ 7- បន្ទប់ជាមួយធុង 8- ប្រភព នៃដែនម៉ាញេទិក ៩-ប៉េងប៉ោងដែលមានអ៊ីដ្រូកាបូន។
អង្គជំនុំជម្រះដែលមានកុងតឺន័រមានធុងបី៖ ធុងធំខាងក្រៅមួយ និងធុងតូចពីរ ដែលដៃនៃសៀគ្វីកណ្តាលឆ្លងកាត់។cannula ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងធុងតូច ធុងត្រូវបានចងខ្សែនៅលើធុងតូច ហើយចុងរបស់ cannula ត្រូវបានចងយ៉ាងតឹងជាមួយនឹងខ្សែស្តើង។ចន្លោះរវាងធុងធំ និងកុងតឺន័រតូចត្រូវបានបំពេញដោយទឹកចម្រោះ ហើយសីតុណ្ហភាពនៅតែថេរដោយសារតែការភ្ជាប់ទៅនឹងឧបករណ៍ផ្លាស់ប្តូរកំដៅ។ចន្លោះនៅក្នុងធុងតូចត្រូវបានបំពេញដោយដំណោះស្រាយ Krebs-Henseleit ដើម្បីរក្សាលទ្ធភាពជោគជ័យនៃកោសិកាសរសៃឈាម។ធុងក៏ត្រូវបានបំពេញដោយដំណោះស្រាយ Krebs-Henseleit ។ប្រព័ន្ធផ្គត់ផ្គង់ឧស្ម័ន (កាបូន) ត្រូវបានប្រើដើម្បីបំភាយសូលុយស្យុងនៅក្នុងធុងតូចនៅក្នុងធុងផ្ទុក និងបន្ទប់ដែលមានធុងផ្ទុក (រូបភាពទី 4) ។
រូបភាពទី 4 បន្ទប់ដែលធុងត្រូវបានដាក់។1-Cannula សម្រាប់បញ្ចុះសរសៃឈាម, 2-Outer Chamber, 3-Small Chamber។ព្រួញបង្ហាញពីទិសដៅនៃសារធាតុរាវគំរូ។
ដើម្បីកំណត់សន្ទស្សន៍ permeability ដែលទាក់ទងនៃជញ្ជាំងសរសៃឈាម សរសៃឈាម carotid របស់កណ្តុរត្រូវបានប្រើ។
ការណែនាំនៃការព្យួរ MNP (0.5mL) ទៅក្នុងប្រព័ន្ធមានលក្ខណៈដូចខាងក្រោម: បរិមាណខាងក្នុងសរុបនៃធុងនិងបំពង់តភ្ជាប់នៅក្នុងរង្វិលជុំគឺ 20mL ហើយបរិមាណខាងក្នុងនៃអង្គជំនុំជម្រះនីមួយៗគឺ 120mL ។ប្រភពដែនម៉ាញេទិកខាងក្រៅគឺជាមេដែកអចិន្រ្តៃយ៍ដែលមានទំហំស្តង់ដារ 2 × 3 ម។វាត្រូវបានដំឡើងនៅពីលើបន្ទប់តូចមួយដែលមានចម្ងាយ 1 សង់ទីម៉ែត្រពីធុង ដោយចុងម្ខាងបែរមុខទៅជញ្ជាំងធុង។សីតុណ្ហភាពត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 37 ° C ។ថាមពលរបស់ម៉ាស៊ីនបូមរំកិលត្រូវបានកំណត់ទៅ 50% ដែលត្រូវនឹងល្បឿន 17 សង់ទីម៉ែត្រ/វិនាទី។ក្នុងនាមជាវត្ថុបញ្ជា គំរូត្រូវបានគេយកនៅក្នុងក្រឡាមួយដោយគ្មានមេដែកអចិន្ត្រៃយ៍។
មួយម៉ោងបន្ទាប់ពីការគ្រប់គ្រងកំហាប់នៃ MNP គំរូរាវមួយត្រូវបានយកចេញពីអង្គជំនុំជម្រះ។កំហាប់ភាគល្អិតត្រូវបានវាស់ដោយឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ spectrophotometer ដោយប្រើ Unico 2802S UV-Vis spectrophotometer (United Products & Instruments, USA)។ដោយគិតពីវិសាលគមស្រូបយកនៃការព្យួរ MNP ការវាស់វែងត្រូវបានអនុវត្តនៅ 450 nm ។
យោងតាមគោលការណ៍ណែនាំរបស់ Rus-LASA-FELASA សត្វទាំងអស់ត្រូវបានចិញ្ចឹម និងចិញ្ចឹមនៅក្នុងកន្លែងដែលគ្មានមេរោគជាក់លាក់។ការសិក្សានេះអនុលោមតាមបទប្បញ្ញត្តិក្រមសីលធម៌ដែលពាក់ព័ន្ធទាំងអស់សម្រាប់ការពិសោធន៍ និងស្រាវជ្រាវសត្វ ហើយបានទទួលការយល់ព្រមខាងសីលធម៌ពីមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្រជាតិ Almazov (IAACUC) ។សត្វ​បាន​ផឹក​ទឹក​ជា​ប្រចាំ ហើយ​ស៊ី​ចំណី​ជា​ប្រចាំ។
ការសិក្សានេះត្រូវបានធ្វើឡើងលើសត្វកណ្ដុរ NSG ដែលមិនមានភាពស៊ាំនឹងភាពស៊ាំបុរសអាយុ 12 សប្តាហ៍ចំនួន 10 ក្បាល (NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/Szj, Jackson Laboratory, USA) 10 ដែលមានទម្ងន់ 22 ក្រាម ± 10% ។ចាប់តាំងពីភាពស៊ាំនៃភាពស៊ាំរបស់សត្វកណ្ដុរត្រូវបានបង្ក្រាប សត្វកណ្ដុរដែលមានភាពស៊ាំចុះខ្សោយនៃខ្សែនេះអនុញ្ញាតឱ្យមានការប្តូរកោសិកា និងជាលិការបស់មនុស្សដោយគ្មានការច្រានចោលការប្តូរ។អ្នកទុកដាក់សំរាមពីទ្រុងផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានចាត់ឱ្យដោយចៃដន្យទៅក្រុមពិសោធន៍ ហើយពួកគេត្រូវបានបង្កាត់ពូជ ឬប៉ះពាល់ជាប្រព័ន្ធទៅនឹងពូកនៃក្រុមផ្សេងទៀត ដើម្បីធានាឱ្យមានការប៉ះពាល់ស្មើគ្នាទៅនឹងមីក្រូជីវតាទូទៅ។
ខ្សែកោសិកាមហារីករបស់មនុស្ស HeLa ត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតគំរូ xenograft ។កោសិកាត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុង DMEM ដែលមានផ្ទុកសារធាតុ glutamine (PanEco, Russia) ដែលត្រូវបានបន្ថែមដោយសេរ៉ូម bovine ទារក 10% (Hyclone, USA), 100 CFU/mL penicillin និង 100 μg/mL streptomycin ។បន្ទាត់កោសិកាត្រូវបានផ្តល់ដោយសប្បុរសដោយមន្ទីរពិសោធន៍បទប្បញ្ញត្តិហ្សែននៃវិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវកោសិកានៃបណ្ឌិត្យសភាវិទ្យាសាស្ត្ររុស្ស៊ី។មុនពេលចាក់ កោសិកា HeLa ត្រូវបានយកចេញពីផ្លាស្ទិចវប្បធម៌ជាមួយនឹងដំណោះស្រាយ trypsin 1: 1: Versene (Biolot ប្រទេសរុស្ស៊ី) ។បន្ទាប់ពីការលាងសម្អាត កោសិកាត្រូវបានផ្អាកក្នុងកម្រិតមធ្យមពេញលេញដល់កំហាប់នៃកោសិកា 5 × 106 ក្នុង 200 μL ហើយត្រូវបានពនឺជាមួយម៉ាទ្រីសភ្នាសបន្ទប់ក្រោមដី (LDEV-FREE, MATRIGEL® CORNING®) (1:1, នៅលើទឹកកក)។ការព្យួរកោសិកាដែលបានរៀបចំត្រូវបានចាក់បញ្ចូលទៅក្នុងស្បែកនៃភ្លៅកណ្តុរ។ប្រើកាលីប័រអេឡិចត្រូនិច ដើម្បីតាមដានការលូតលាស់ដុំសាច់រៀងរាល់ 3 ថ្ងៃម្តង។
នៅពេលដែលដុំសាច់ឈានដល់ 500 mm3 មេដែកអចិន្ត្រៃយ៍មួយត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងជាលិកាសាច់ដុំរបស់សត្វពិសោធន៍នៅជិតដុំសាច់។នៅក្នុងក្រុមពិសោធន៍ (MNPs-ICG + tumour-M) 0.1 mL នៃការព្យួរ MNP ត្រូវបានចាក់ និងប៉ះពាល់ទៅនឹងដែនម៉ាញេទិក។សត្វពាហនៈទាំងមូលដែលមិនបានព្យាបាលត្រូវបានគេប្រើជាវត្ថុបញ្ជា (ផ្ទៃខាងក្រោយ) ។លើសពីនេះទៀតសត្វដែលចាក់ជាមួយ MNP 0.1 mL ប៉ុន្តែមិនត្រូវបានផ្សាំដោយមេដែក (MNPs-ICG + tumor-BM) ត្រូវបានគេប្រើ។
ការមើលឃើញ fluorescence នៃគំរូនៅក្នុង vivo និង in vitro ត្រូវបានអនុវត្តនៅលើ IVIS Lumina LT series III bioimager (PerkinElmer Inc., USA)។សម្រាប់ការមើលឃើញនៅក្នុង vitro បរិមាណនៃ 1 mL នៃ PLA-EDA-ICG សំយោគ និង MNP-PLA-EDA-ICG ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងអណ្តូងចាន។ដោយគិតពីលក្ខណៈ fluorescence នៃការជ្រលក់ពណ៌ ICG តម្រងដ៏ល្អបំផុតដែលត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់អាំងតង់ស៊ីតេនៃពន្លឺនៃគំរូត្រូវបានជ្រើសរើស៖ ប្រវែងរលករំភើបអតិបរមាគឺ 745 nm និងរលកបំភាយគឺ 815 nm ។កម្មវិធី Living Image 4.5.5 (PerkinElmer Inc.) ត្រូវបានប្រើដើម្បីវាស់បរិមាណអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence នៃអណ្តូងដែលមាន conjugate ។
អាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence និងការប្រមូលផ្តុំនៃ MNP-PLA-EDA-ICG conjugate ត្រូវបានវាស់នៅក្នុងកណ្តុរគំរូដុំសាច់នៅក្នុង vivo ដោយគ្មានវត្តមាន និងការអនុវត្តវាលម៉ាញេទិកនៅកន្លែងចាប់អារម្មណ៍។សត្វកណ្ដុរត្រូវបានចាក់ថ្នាំស្ពឹកដោយសារធាតុ isoflurane ហើយបន្ទាប់មក 0.1 mL នៃ MNP-PLA-EDA-ICG conjugate ត្រូវបានចាក់តាមសរសៃកន្ទុយ។សត្វកណ្តុរដែលមិនបានព្យាបាលត្រូវបានគេប្រើជាការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមានដើម្បីទទួលបានផ្ទៃខាងក្រោយ fluorescent ។បន្ទាប់ពីគ្រប់គ្រងការរួមផ្សំតាមសរសៃឈាម សូមដាក់សត្វនៅលើដំណាក់កាលកំដៅ (37°C) នៅក្នុងបន្ទប់នៃ IVIS Lumina LT series III fluorescence imager (PerkinElmer Inc.) ខណៈពេលដែលរក្សាការដកដង្ហើមដោយប្រើ 2% isoflurane anesthetization។ប្រើតម្រងដែលភ្ជាប់មកជាមួយរបស់ ICG (745–815 nm) សម្រាប់ការចាប់សញ្ញា 1 នាទី និង 15 នាទីបន្ទាប់ពីការណែនាំ MNP ។
ដើម្បីវាយតម្លៃការប្រមូលផ្តុំនៃ conjugate នៅក្នុងដុំសាច់តំបន់ peritoneal របស់សត្វត្រូវបានគ្របដណ្តប់ដោយក្រដាសដែលធ្វើឱ្យវាអាចលុបបំបាត់ពន្លឺភ្លឺដែលទាក់ទងនឹងការប្រមូលផ្តុំនៃភាគល្អិតនៅក្នុងថ្លើម។បន្ទាប់ពីសិក្សាការចែកចាយជីវសាស្ត្រនៃ MNP-PLA-EDA-ICG សត្វត្រូវបានសម្លាប់ដោយមនុស្សដោយការប្រើថ្នាំសន្លប់ isoflurane ច្រើនពេកសម្រាប់ការបំបែកតំបន់ដុំសាច់ជាបន្តបន្ទាប់ និងការវាយតម្លៃបរិមាណនៃវិទ្យុសកម្ម fluorescence ។ប្រើកម្មវិធី Living Image 4.5.5 (PerkinElmer Inc.) ដើម្បីដំណើរការការវិភាគសញ្ញាដោយដៃពីតំបន់ចំណាប់អារម្មណ៍ដែលបានជ្រើសរើស។ការវាស់វែងចំនួនបីត្រូវបានគេយកសម្រាប់សត្វនីមួយៗ (n = 9) ។
នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងមិនបានកំណត់បរិមាណនៃការផ្ទុកដោយជោគជ័យនៃ ICG នៅលើ MNPs-ICG នោះទេ។លើសពីនេះទៀតយើងមិនបានប្រៀបធៀបប្រសិទ្ធភាពនៃការរក្សាទុកនៃភាគល្អិតណាណូក្រោមឥទ្ធិពលនៃមេដែកអចិន្ត្រៃយ៍នៃរាងផ្សេងគ្នានោះទេ។លើសពីនេះទៀតយើងមិនបានវាយតម្លៃឥទ្ធិពលរយៈពេលវែងនៃដែនម៉ាញេទិកលើការរក្សាទុកនៃ nanoparticles នៅក្នុងជាលិកាដុំសាច់នោះទេ។
ភាគល្អិតណាណូគ្របដណ្តប់ដោយមានទំហំមធ្យម 195.4 nm ។លើសពីនេះទៀតការព្យួរមានផ្ទុកសារធាតុ agglomerates ដែលមានទំហំមធ្យម 1176.0 nm (រូបភាព 5A) ។បនា្ទាប់មកផ្នែកត្រូវបានត្រងតាមរយៈតម្រង centrifugal ។សក្តានុពល zeta នៃភាគល្អិតគឺ -15.69 mV (រូបភាព 5B) ។
រូបភាពទី 5 លក្ខណៈសម្បត្តិរូបវន្តនៃការព្យួរ: (A) ការចែកចាយទំហំភាគល្អិត;(ខ) ការចែកចាយភាគល្អិតនៅសក្តានុពល zeta;(គ) រូបថត TEM នៃភាគល្អិតណាណូ។
ទំហំភាគល្អិតជាមូលដ្ឋាន 200 nm (រូបភាព 5C) ដែលផ្សំឡើងដោយ MNP តែមួយដែលមានទំហំ 20 nm និងសែលសរីរាង្គផ្សំ PLA-EDA-ICG ដែលមានដង់ស៊ីតេអេឡិចត្រុងទាប។ការបង្កើត agglomerates នៅក្នុងដំណោះស្រាយ aqueous អាចត្រូវបានពន្យល់ដោយម៉ូឌុលទាបនៃកម្លាំងអេឡិចត្រុងនៃ nanoparticles បុគ្គល។
សម្រាប់មេដែកអចិន្ត្រៃយ៍ នៅពេលដែលមេដែកត្រូវបានប្រមូលផ្តុំនៅក្នុងកម្រិតសំឡេង V កន្សោមអាំងតេក្រាលត្រូវបានបែងចែកទៅជាអាំងតេក្រាលពីរគឺ កម្រិតសំឡេង និងផ្ទៃ៖
ក្នុងករណីគំរូដែលមានមេដែកថេរ ដង់ស៊ីតេបច្ចុប្បន្នគឺសូន្យ។បន្ទាប់មក កន្សោមនៃវ៉ិចទ័រអាំងឌុចស្យុងម៉ាញេទិកនឹងយកទម្រង់ដូចខាងក្រោមៈ
ប្រើកម្មវិធី MATLAB (MathWorks, Inc., USA) សម្រាប់ការគណនាលេខ ETU “LETI” លេខអាជ្ញាប័ណ្ណសិក្សា 40502181។
ដូចដែលបានបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 7 រូបភាពទី 8 រូបភាពទី 9 រូបភាព-10 វាលម៉ាញេទិកខ្លាំងបំផុតត្រូវបានបង្កើតដោយមេដែកតម្រង់ទិសអ័ក្សពីចុងស៊ីឡាំង។កាំនៃសកម្មភាពដែលមានប្រសិទ្ធភាពគឺស្មើនឹងធរណីមាត្រនៃមេដែក។នៅក្នុងមេដែករាងស៊ីឡាំងដែលមានស៊ីឡាំងដែលមានប្រវែងធំជាងអង្កត់ផ្ចិតរបស់វា ដែនម៉ាញេទិចខ្លាំងបំផុតត្រូវបានគេសង្កេតឃើញក្នុងទិសដៅអ័ក្ស-រ៉ាឌីកាល់ (សម្រាប់សមាសធាតុដែលត្រូវគ្នា);ដូច្នេះ ស៊ីឡាំងមួយគូដែលមានសមាមាត្រធំជាង (អង្កត់ផ្ចិត និងប្រវែង) ការស្រូបយក MNP គឺមានប្រសិទ្ធភាពបំផុត។
រូបភាពទី 7 ធាតុផ្សំនៃអាំងតង់ស៊ីតេម៉ាញ៉េទិច Bz តាមអ័ក្ស Oz នៃមេដែក;ទំហំស្តង់ដារនៃមេដែក៖ បន្ទាត់ខ្មៅ 0.5 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌ខៀវ 2 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌បៃតង 3 × 2mm, បន្ទាត់ក្រហម 5 × 2mm ។
រូបភាពទី 8 សមាសធាតុអាំងឌុចស្យុងម៉ាញ៉េទិច Br កាត់កែងទៅនឹងអ័ក្សមេដែក Oz;ទំហំស្តង់ដារនៃមេដែក៖ បន្ទាត់ខ្មៅ 0.5 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌ខៀវ 2 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌បៃតង 3 × 2mm, បន្ទាត់ក្រហម 5 × 2mm ។
រូបភាពទី 9 សមាសធាតុអាំងតង់ស៊ីតេម៉ាញ៉េទិច Bz នៅចម្ងាយ r ពីអ័ក្សចុងនៃមេដែក (z=0);ទំហំស្តង់ដារនៃមេដែក៖ បន្ទាត់ខ្មៅ 0.5 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌ខៀវ 2 × 2mm, បន្ទាត់ពណ៌បៃតង 3 × 2mm, បន្ទាត់ក្រហម 5 × 2mm ។
រូបភាពទី 10 សមាសធាតុអាំងឌុចស្យុងម៉ាញ៉េទិចតាមបណ្តោយទិសរ៉ាឌីកាល់;ទំហំមេដែកស្តង់ដារ៖ បន្ទាត់ខ្មៅ 0.5 × 2mm បន្ទាត់ពណ៌ខៀវ 2 × 2mm បន្ទាត់ពណ៌បៃតង 3 × 2mm បន្ទាត់ក្រហម 5 × 2mm ។
គំរូអ៊ីដ្រូឌីណាមិកពិសេសអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីវិធីសាស្រ្តនៃការចែកចាយ MNP ទៅកាន់ជាលិកាដុំសាច់ ប្រមូលផ្តុំភាគល្អិតណាណូនៅក្នុងតំបន់គោលដៅ និងកំណត់ឥរិយាបថរបស់ nanoparticles ក្រោមលក្ខខណ្ឌ hydrodynamic នៅក្នុងប្រព័ន្ធឈាមរត់។មេដែកអចិន្រ្តៃយ៍អាចត្រូវបានប្រើជាដែនម៉ាញេទិកខាងក្រៅ។ប្រសិនបើយើងព្រងើយកន្តើយចំពោះអន្តរកម្មម៉ាញ៉េទិចរវាងភាគល្អិត nanoparticles ហើយមិនបានពិចារណាលើគំរូវត្ថុរាវម៉ាញេទិចទេ នោះវាគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីប៉ាន់ប្រមាណអន្តរកម្មរវាងមេដែក និង nanoparticles តែមួយជាមួយនឹង dipole-dipole ប្រហាក់ប្រហែល។
ដែល m ជាពេលម៉ាញេទិចរបស់មេដែក r គឺជាវ៉ិចទ័រកាំនៃចំណុចដែលភាគល្អិតណាណូស្ថិតនៅ ហើយ k គឺជាកត្តាប្រព័ន្ធ។នៅក្នុងការប៉ាន់ប្រមាណ dipole វាលនៃមេដែកមានការកំណត់ស្រដៀងគ្នា (រូបភាពទី 11) ។
នៅក្នុងដែនម៉ាញេទិកឯកសណ្ឋាន ភាគល្អិត nanoparticles បង្វិលតែតាមបន្ទាត់នៃកម្លាំងប៉ុណ្ណោះ។នៅក្នុងដែនម៉ាញេទិកមិនស្មើគ្នា កម្លាំងធ្វើសកម្មភាពលើវា៖
តើដេរីវេនៃទិសដៅដែលបានផ្តល់ឱ្យ l.លើសពីនេះកម្លាំងទាញ nanoparticles ចូលទៅក្នុងតំបន់មិនស្មើគ្នាបំផុតនៃវាល នោះគឺកោង និងដង់ស៊ីតេនៃបន្ទាត់នៃកម្លាំងកើនឡើង។
ដូច្នេះ វាគឺជាការចង់ប្រើមេដែកដ៏រឹងមាំគ្រប់គ្រាន់ (ឬខ្សែសង្វាក់មេដែក) ជាមួយនឹង anisotropy អ័ក្សជាក់ស្តែងនៅក្នុងតំបន់ដែលភាគល្អិតស្ថិតនៅ។
តារាងទី 1 បង្ហាញពីសមត្ថភាពនៃមេដែកតែមួយដែលជាប្រភពដែនម៉ាញេទិកគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីចាប់យក និងរក្សា MNP នៅក្នុងគ្រែសរសៃឈាមនៃវាលកម្មវិធី។